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無(wú)論氣相還是液相，色譜柱都是分離的核心。液相色譜柱的固定相可以說(shuō)是五花八門，有C18，C8，C4，苯基柱，氰基柱，氨基柱等等。色譜柱使用的好壞，直接關(guān)系到分析分離的結(jié)果，我們都知道氨基柱有使用壽命短等問(wèn)題，今天在這里給大家?guī)?lái)氨基柱的使用維護(hù)指南，希望通過(guò)更好的維護(hù)使用，讓我們手中的色譜柱發(fā)揮出更大的作用。

說(shuō)起氨基柱，大家熟悉的是拿它來(lái)做糖的分析。這是一個(gè)典型的HILIC模式。除了HILIC模式以外，氨基柱還可以用做正相和弱陰離子交換兩種模式?？梢哉f(shuō)應(yīng)用范圍和模式非常廣。

ThermoFisher色譜柱系列大家族中擁有三款氨基鍵合相的色譜柱，分別是Hypersil GOLD Amino、Syncronis Amino和Hypersil APS-2。有人會(huì)問(wèn)，都是氨基柱，他們的區(qū)別又在哪里呢?

讓小編來(lái)給大家一一做個(gè)介紹。Hypersil Gold Amino這款氨基柱具有更對(duì)稱的峰型，在生產(chǎn)工藝上有更致密的鍵合技術(shù)，硅膠表面殘存的硅醇基數(shù)量低。Syncronis Amino這款氨基柱金屬雜質(zhì)含量在同類色譜柱中低，能夠帶來(lái)更高的柱效,而Hypersil APS-2這款氨基柱在分離多組分化合物時(shí)更具優(yōu)勢(shì)，并且在美國(guó)藥典和歐洲藥典中多有應(yīng)用。說(shuō)了這么多我們看看下面該如何使用維護(hù)。

保存液

（Gold Amino和Syncronis Amino）出廠保存液為乙醇，APS-2柱出廠保存液為：異辛烷：乙醇：水=85:14.7:0.3，新色譜柱如果使用反相流動(dòng)相條件，請(qǐng)充分置換色譜柱內(nèi)正相溶劑。

活化

新色譜柱如果使用HILIC模式，使用前請(qǐng)使用異丙醇小流速過(guò)夜平衡色譜柱。流速建議0.1mL/min,之后再轉(zhuǎn)換到100%乙腈沖洗20柱體積，然后轉(zhuǎn)換到和流動(dòng)相相同比例的不含鹽的乙腈水體系沖洗20柱體積。

沖洗

用乙腈：水=60:40條件對(duì)色譜柱進(jìn)行清洗，清洗時(shí)，不建議水相比例超過(guò)40%，過(guò)高使用水相容易導(dǎo)致鍵合相水解。

色譜柱再生

當(dāng)色譜柱經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間使用，柱效很低時(shí)，可以對(duì)色譜柱再生處理，用乙腈：水（水中加入0.05%氨水）=60:40條件沖洗30柱體積。

保存

一個(gè)月以內(nèi)的保存，請(qǐng)使用與所選用流動(dòng)相組成相同的有機(jī)溶劑和水的混合溶液（不含酸、無(wú)機(jī)鹽）進(jìn)行置換，請(qǐng)避免只用水進(jìn)行置換；一個(gè)月以上的長(zhǎng)期保存，在進(jìn)行了上述處理之后，請(qǐng)用乙腈置換并保存。

氨基柱糖類的分析

1

請(qǐng)?jiān)O(shè)定乙腈/水的流動(dòng)相條件。乙腈的濃度越高，則對(duì)糖的保留能力越強(qiáng)。

2

若采用含甲醇或緩沖鹽的流動(dòng)相，峰會(huì)展寬。

3

若將糖的水溶液作為樣品注入，譜峰會(huì)展寬。請(qǐng)使用含乙腈50%以上的溶劑來(lái)配制糖類樣品。

4

曾在酸性條件下使用過(guò)的色譜柱，糖類分析的保留時(shí)間、峰形會(huì)發(fā)生變化。

離子型物質(zhì)的分析

1

請(qǐng)?jiān)O(shè)定乙腈/磷酸緩沖液且具有一定pH值的流動(dòng)相條件。

2

考察流動(dòng)相條件時(shí)，按照pH由高到低的順序進(jìn)行考察。如果曾經(jīng)在低pH下使用，填料的表面將無(wú)法回到初始狀態(tài)。

3

有時(shí)需要長(zhǎng)時(shí)間平衡色譜柱(24小時(shí)以上)。平衡所需時(shí)間與通液量和鹽濃度緊密相關(guān)，因此，時(shí)間緊急時(shí)請(qǐng)?zhí)岣吡魉伲騪H不變而增加流動(dòng)相的鹽濃度來(lái)進(jìn)行平衡。